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指南非淋菌性尿道炎病原学诊断专家共识

来源:淋巴水肿治疗 时间:2018-6-27

长期以来,传统的培养法以及免疫学方法诊断非淋菌性尿道炎(nongonococcalurethritis,NGU)病原体存在一定程度的漏诊或误诊。随着诊断技术的不断发展,分子诊断已普遍应用于临床,包括DNA检测和RNA检测等技术都为诊断这些病原体提供了更好的方法。为规范此类疾病的诊断程序,提高疾病诊断水平,中华医学会男科学分会组织国内相关专家经过多次讨论,制订了NGU病原学诊断专家共识。

实验室诊断方法

CT检测

细胞分离培养法

CT直径介于病毒与立克次体之间,为原核细胞型微生物,能通过滤菌器,有独特生活周期。一直以来,细胞分离培养法被认为是“金标准”方法,其需要用HeLa细胞、McCoy细胞或鸡胚卵黄囊接种、分离培养鉴定CT。但是由于分离培养操作复杂、技术及设备要求高、所需时间长和敏感性受标本采集等限制,难以作为临床常规检查和流行病学筛查,只能作为其他方法的参考标准应用。

免疫学检测

常用免疫学方法有直接荧光抗体试验(DFA)和酶联免疫法(EIA),这两种方法的特点是:①适用于多种类型的标本;②特异性和敏感性较培养法高,但判定结果带有主观性;③对操作有较高要求,不适用于大量标本的检测。

近年来发展的胶体金免疫法较传统的免疫方法应用很广泛,其优点是简易、方便、快速,操作简便,并可就单一标本立即检测,缺点是敏感性仅为细胞培养法的75%~88%[63-64]。

分子生物学检测

在目前所有检测方法中,分子检测技术灵敏度和特异性最好,是首选的检测方法。分子生物学检测主要有DNA和RNA检测两大类。

DNA检测技术主要包括了聚合酶链反应(polymerasechainreaction,PCR)和连接酶链反应(linkchainreaction,LCR)。PCR电泳因其检测结果存在假阳性而导致特异性下降;而荧光定量PCR杂交法、PCR微孔板杂交法及套式PCR等方法,较好地解决了敏感性和特异性问题。LCR法可解决PCR中存在的假阳性问题,敏感性也有所提高;同时,标本可以用尿液或拭子,减轻了患者的痛苦,易被患者接受,是一种较好的检测方法。

目前检测CT最好的方法是RNA检测。RNA检测主要包括SAT(simultaneousamplificationandtesting,SAT)和TMA(transcription-mediatedamplification,TMA)技术,这两种技术的扩增仪原理完全相同。由于RNA在非病毒性病原体微生物细胞中存在多拷贝(其16SrRNA在每个细胞中多达拷贝),与以DNA为靶标的PCR等技术相比,其灵敏度和准确性更高,并且可以检测包括尿液在内的各种样本,且不同部位的样本结果一致性很好。研究表明,在男性患者中,尿液和尿道拭子RNA检测结果的一致性几乎可达%。另外,由于RNA只存在于活的细菌中,所以RNA检测结果可以用于疗效判断,符合目前精准医疗的要求,是目前为止最好的检测方法。

MG检测

培养法

MG的传统检测方法是用SP4培养基培养1~5个月,易污染,且要观察SP4培养基颜色的变化来判断,难以客观评价结果,因此难在临床应用。Vero细胞培养法约3周左右,仍因其所需时间过长、培养过程中菌株容易死亡等原因,不适用于临床快速检测。

免疫学检测

MG与某些微生物(如肺炎支原体)有交叉抗原,故免疫学检测方法受到一定限制,免疫法的敏感性和特异性都比较低。Jurstrand等基于脂结合膜蛋白的酶联免疫吸附试验检测法(LAMP-ELISA)虽然具有较高的种属特异性,但其检测结果随时间波动较大,影响因素较多,亦较难应用于临床诊断。

分子检测法

目前用于MG检测的主流方法是分子生物检测,DNA和RNA检测都已应用于MG的临床检测。RNA检测MG目前仅有SAT技术。与CT检测类似,RNA检测具有取样方便、灵敏度高、特异性好且可用于疗效判定等优点,是MG检测的首选方法。

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