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如何设门才能获得最纯的淋巴细胞群体

来源:淋巴水肿治疗 时间:2018-3-7

流式中文网论坛一位站友问:参与卫生厅淋巴细胞亚群的室间质控,但发现两项未通过,均低于靶值下限(见下图)。

从这个表格中,我们可以看出,这位站友那边基本上都偏低一些,这当然不能排除标本运输的问题,但看了他提供的设门图之后,我发现这两个[未通过]的标本均存在十字门偏上的问题,没有准确地放在正确的分界处(如下图):

如果这位站友在分析时能够将十字门移下来一些,那么可能百分比就刚好满足下限了。

不过由上面各类亚群均偏低,我还想到了,这位站友或许还存在淋巴细胞亚群设门不纯的问题,如果仅用FSC/SSC设门,很可能混入红细胞或碎片或单核细胞,导致淋巴细胞群体增多,分母增大,最后导致比例降低。即使用CD45/SSC设门,在实际检测过程中,很多时候,单核细胞的干扰也很难排除,那么怎么办呢?来看看CytometryA杂志年的一篇文章,很简单,加一个CD33即可(如下图):

左侧三个图可以忽略,简单的设门过程就是首先用CD45/SSC圈中单个细胞区域(图中直接命名为Lympho了),然后在CD45/CD33上选择CD33阴性的细胞群,即为正确的淋巴细胞群体了,然后作者用CD3、CD56、CD19设门后分析T、B、NK三类细胞,加起来比例99.7%,说明这类淋巴细胞几乎只包含T、B、NK,而没有什么明显的单核细胞混杂了。

[文献来源]OptimizedQuantificationofLymphocyteSubsetsbyuseofCD7andCD33







































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